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頂空氣相色譜系列講座（15)
人體血液中一氧化碳的分析——定性分析2
一、檢材采取和保存
CO中毒惟一重要檢材是血液-心血，非心包液、胸腔雜血。為防止血樣凝成塊，可在血樣中加少許EDTA固體，因凝成塊狀的血定量偏低。當(dāng)死亡時間長而取不出心血時，取帶心包液的心血或胸腔血代替，送檢時一定要對所送檢材加以充分說明，使用時先離心只取用紅血球多的部分，其它血清和雜質(zhì)棄去。
CO中毒血可保存較長時間，不易腐敗，曾有報導(dǎo)從埋后100 多天的尸體血液中檢出CO。含CO的血樣不密封或露置空氣中，其血中HbCO 易被空氣中氧所置換又轉(zhuǎn)化為HbO2，使分析結(jié)果偏低，
一般采心血量10~20mL即可，裝滿容器密封低溫保存。如需長期保存，為防止HbCO的損失，可于血液表面加0.5~1cm厚的液體石蠟，再密封置低溫冰箱中保存。
二、一氧化碳定性分析
⒈ 化學(xué)檢測法
⑴ 氫氧化鈉法——取含CO的血與空白血各少許均用20倍水稀釋，加入等體積的30%NaOH水溶液混合，對正常空白血即出現(xiàn)綠褐色絮狀物沉淀，對含CO的血則出現(xiàn)紅色絮狀物浮于液面，紅色絮狀物能逐步氧化為綠褐色絮狀物，變色速度取決于CO在血中的量。
⑵ 鞣酸試驗——取含CO的血與空白血各少許均用4倍水稀釋，加入等體積的3%鞣酸溶液混勻放置，空白血呈灰色，含CO的血則呈桃紅色，顏色保留時間較長，能辨認(rèn)CO飽和度超過20%的血。
⑶ 快速加熱法——取含CO的血與空白血各1mL，在沸水俗中邊煮邊對比觀察顏色變化，正常血為褐黑色，含CO的血呈桃紅色（飽和度需達(dá)30%~40%才有此顏色）
⒉ 鈀鏡反應(yīng)
基于氯化鈀被CO還原為金屬鈀，浮在溶液表面形成金屬光澤的鈀膜稱為鈀鏡。還可根據(jù)還原生成“鈀鏡"的程度來分析血中CO的量。
擴(kuò)散盒法——在擴(kuò)散盒內(nèi)圈加0.5%氯化鈀溶液0.5mL，外圈中加2mL檢材血，立即蓋上經(jīng)蒸餾水濕潤過的蓋子，再從蓋子邊上的小口處滴加10滴40%的硫酸，速將蓋子擰緊密封，輕輕轉(zhuǎn)動擴(kuò)散盒，使硫酸與檢材血充分接觸，如室溫<5℃需水浴上稍加熱，5分鐘后注意觀察擴(kuò)散盒內(nèi)圈有明顯鈀鏡產(chǎn)生。
PdCl2＋CO＋H2O → Pd↓＋CO2＋HCl
為防止硫化氫的干擾，在含CO的血中加稀酸促使碳氧血紅蛋白解離同時，可加入醋酸/醋酸鉛除去干擾。此方法靈敏度高，但屬性差點(diǎn)。
